Descripción
ONE 4-ALL Kit Genomic DNA Mini-Preps está diseñado para una rápida purificación de ADN genómico (así como otras formas de ADN, ej. Mitocondrial) de tejidos animales frescos, congelados o células, sangre o bacterias incluidas en parafina.
Las muestras se lisan primero utilizando proteinasa K en un Buffer optimizado. El lisado se carga en la columna de centrifugación EZ-10, y el ADN se une selectivamente a la membrana EZ incrustado en la columna. Durante las etapas de lavado, proteínas y otros impurezas se eliminan y el ADN se eluye en un buffer de bajo contenido de sal. El ADN purificado típicamente tiene una taza de A260/A280 de 1.7-1.9, y es muy adecuado para la mayoría de las aplicaciones posteriores tales como PCR, transferencia de Southern, RAPD, RFLP.
El Procedimiento para la purificación NO requiere extracción con fenol/cloroformo o precipitación por alcohol, e implica una manipulación mínima. Todo el procedimiento dura sólo 20 minutos después de la preparación de la muestra.
El Rendimiento de ADN varia entre muestras dependiendo de la cantidad y tipo de tejido, para la mayoría de tejidos 5-15 µg de ADN se pueden obtener a partir de 25 mg del material.
caracteristicas
- DO260 / DO280 de ADN purificado es generalmente 1,7-1,9.
- Purificación de ADN Genómico de alta calidad con peso molecular ≥20 kb.
- Procesamiento rápido y fácil de utilizar, formato de columna-spin rápida.
- Compatible con muchas aplicaciones posteriores tales como PCR, digestión de restricción e hibridación.
- No Requiere Extracción con fenol/cloroformo o precipitación por etanol.
- Alto Rendimiento y reproducibilidad.
- Compatible una variedad de muestras de diferentes fuentes.
Almacenamiento
Ez-10 spin column y todos los buffers deben ser almacenados en seco, a temperatura ambiente (15-25 °C), son estables durante 1 año en estas condiciones. La solución de proteinasa K es estable a temperatura ambiente durante 6 meses y se almacena a 2-8 °C durante 1 año.
Contenido del Kit
| Componentes | BS88503,
50 Preps |
BS88504,
100 Preps |
BS88505,
250 Preps |
| Buffer ACL | 10 ml | 20 ml | 50 ml |
| Buffer CL | 12 ml | 24 ml | 60 ml |
| Solución CW1 (concentrado) | 13 ml | 26 ml | 65 ml |
| Solución CW2 (concentrado) | 9 ml | 18 ml | 45 ml |
| Buffer CE (pH9.0) | 15 ml | 30 ml | 2 x 30 ml |
| Proteinasa K | 1.25 ml | 2 x 1.25 ml | 5 x 1.25 ml |
| Columnas EZ-10 (Con Tubos para Colección de 2 ml) | 50 | 100 | 250 |
| Protocolo | 1 | 1 | 1 |
Nota:
- El Buffer ACL y Buffer CL pueden formar precipitados durante almacenamiento, calentar a 56 °C para disolver antes del uso.
- Solución CW1 y CW2 son proporcionadas como concentrados. Antes de usar, agregar etanol (96-100%) de acuerdo a las notas en la página 4 del Manual, para obtener una solución funcional.
Manual del ONE 4-ALL Kit Genomic DNA Mini-Preps
