Una PCR exitosa depende de dos componentes cruciales buffer optimizado y una ADN Polimerasa de alta calidad
La ADN polimerasa posee cuatro propiedades básicas:
- estabilidad térmica
- tasa de extensión
- fidelidad
- procesividad
Las diferentes configuraciones de de estas cuatro variables producen diferentes clases de ADN polimerasas, las cueles nombraremos a continuación:
ADN Polimerasa Estándar
Ideal para PCR de rutina como para detección de producto amplificado y la estimación del tamaño del producto. dejando una base única A’ colgada para inserción a vectores de clonación de T/A (MyTaq)
Polimersa ¨Hot-Start¨
utilizado para suprimir la amplificación de productos no específicos durante la instalación y para incrementar el rendimiento del producto deseado. Útil cuando se utilizan varios pares de oligos (MyTaq HS, MyFi)
Polimerasa de Alta Fidelidad
Remueve bases erróneas incorporadas en la hebra de DNA. Ideal para clonación y expresión de producto amplificado, estudios de mutagénesis y aplicaciones relacionadas (ACCUZYME, VELOCITY).
Polimerasa para amplificación de amplicones
Amplificación de amplicones largos combina la procesividad de la polimerasa de ADN estándar con exactitud de una polimerasa de corrección de la polimerasa. Esto se lograr al mezclar dos polimerasas con un buffer optimizado (RANGER).
